細菌水解產物制造技術

生產飼料或飼料組分，例如可口性提高制劑的方法，所述方法包含用酶法水解作用來處理包含甲烷營養型細菌的微生物培養物。（*該技術在2023年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】
?細菌水解產物
本專利技術涉及從細菌生物量(biomass)，特別從包含甲烷營養型細菌的細菌培養物生產可口性(palatability)提高的水解產物的方法。特別發現此產物在人和動物食物用作替代傳統酵母衍生物的養分或口味(flavour)提高劑。
技術介紹
近來，開發可摻入人和/或動物食用的食物的蛋白質新來源引起了很多注意。若干含蛋白質的不同物質已被建議作為人類食物中更多傳統來源的蛋白質，如魚粉，大豆(soya)產品和血漿的替代物，并作為動物飼料。這些物質包括含蛋白質微生物(本文也指“單細胞蛋白質”)如真菌，酵母和細菌。單細胞蛋白質物質可被直接用于食物，例如作為噴射干燥(spray?dried)產物，或者所述生物量可在使用前，例如用技術如均一化和/或分離，來進一步處理。例如，WO01/60974公開生產具有優異功能特征的細菌生物量的均一化衍生物的過程，該衍生物可在數種食品制備中用作，例如膠凝劑或乳化劑。今日，大多廣泛應用的單細胞蛋白質衍生自真菌或酵母。例如，眾所周知酵母用于釀造，制酒和培烤產業。數種酵母加工衍生物也已知用于制備飼料。例如，酵母自溶(autolysis)產生數種已知的用作食品中調味料(flavouring)或調味品(seasoning)的細胞組分，例如在調味料(sauce)，肉汁(gravies)等的制備過程中。然而，一般需要相對大量的酵母自溶物(autolysate)來獲得所需的口感提高的效果。并且，酵母自溶一般緩慢而且需要數天來完成適宜程度的消化。因此一般需要作為自溶引發劑(initiator)或刺激劑(stimulator)的添加劑，例如巰基試劑，來加快所述自溶方法。這增加了商業生產酵母自溶物的成本。對能增加人和動物食品可口性的替代物質，特別是可以大量生產并且成本相對低的物質的需要是持續的。特別需要能作為口味提高劑的物質。
技術實現思路
-->現在我們驚喜發現用酶法水解含甲烷營養型細菌的生物量，具有生產有效的可口性提高組分，特別是口味組分的效果，該組分也被用作養分，即飼料或飼料組分。因此，一方面，本專利技術提供生產飼料或飼料組分，例如可口性提高制劑的方法，所述方法包含用酶法水解處理包含甲烷營養型細菌的微生物培養物。通過此方法生產的水解產物是本專利技術的另一方面。本專利技術生產的水解產物通常可被用作魚或貝殼類動物(shellfish)的飼料或飼料組分，例如見PCT/GB02/03795描述(其附件隨同遞交)其內容引入本文作為參考。類似，所述水解產物可特別被用作寵物食物，特別是狗食的口味提高劑，例如見英國專利申請No.0203907.1描述(其附件隨同遞交)其內容引入本文作為參考。本專利技術水解產物特別優選用作丸狀可擠壓(extruded)魚食的組分。所述魚食丸通常也包含蛋白質和脂質，例如魚粉和魚和/或植物油，及少量碳水化合物，例如植物源淀粉。本文所用術語“可口性”包括所有可為人或動物感受的食品性狀。這些性狀不僅包括香味，也包括味道和質地(texture)。也認為術語“可口性”包括食品的其他性狀，例如可消化性(digestibility)。術語“可口性提高制劑”被認為包括具有所需可口性性狀，或者當存在于任何食品時可有效提高所述食物其他組分的可口性(例如口味)的物質。在存在一或多種能夠水解(例如通過水解降解)所述細胞結構和/或細胞內組分的酶，優選能夠水解所述細胞核酸成分的酶或酶系統時，進行本專利技術方法中的水解。本領域技術人員可很容易地確定能夠進行水解的合適的酶和酶系統。優選，這些包括能夠水解所述生物量的DNA和/或RNA成分(優選所述RNA成分)來生產相應的核苷酸，優選5′-核苷酸的核酸酶。此酶的實施例是Enzyme?RP-1(得自AmanoPharmaceutical?Co.，Ltd.)。Enzyme?RP-1是能夠將RNA水解為核苷酸如5′-AMP，5′-GMP，5′-CMP和5′-UMP的5′-磷酸二酯酶(E.C.No.2.7.7.16，CAS?No.9001-99-4)制備物。優選，具有5′-腺苷脫氨酶活性并因此能夠將5′-AMP轉化為5′-IMP的酶可與所述(一或多種)核酸酶組合(同時或，更優選分開，例如順序)使用。已發現此處理增加了提高所述最終水解產物可口性的效果。Deamizyme?50000(Amano?PharmaceuticalsCo.，Ltd.)是此具有5′-腺苷脫氨酶強活性的酶的一個實施例。它在pH范圍4.0-7.0是穩定的，并且最適pH為約5.6。-->在本專利技術一方面，能夠水解所述細胞核酸成分的酶或酶系統可與至少一種能夠進行蛋白質水解的蛋白酶組合使用。它具有提高所述最終產物的5′-核苷酸成分的效果并也能使任何苦的蛋白質水解產物脫去苦味，從而提高味道的開發。根據每種酶的性質(即最適溫度，pH等)，可同時使用它們來處理所述細菌生物量。然而，通常，用所述核酸酶和蛋白酶酶/酶系統處理可分開，例如順序進行。適用于本專利技術方法的一個蛋白酶實施例是Flavourzyme(得自Novo?Nordisk?A/S，Denmark)。Flavourzyme是真菌蛋白酶/肽酶復合物，其含有內切蛋白酶和外切蛋白酶(exoprotease)并能夠在中性或微酸性條件下水解蛋白質。其它可用于本專利技術方法的蛋白水解酶包括Alcalase(得自NovoNordisk，Denmark)和Promod?298L(Biocatalysts)。然而，這些酶一般不如Flavourzyme優選，因為它們具有能降解5′-核苷酸的磷酸酶的一定程度的次級活性(secondary?activity)。可進行水解并因此產生水解產物的適宜條件依賴于所用酶或酶系統的確切性質，它可由本領域技術人員容易地確定。溫度條件將能夠不失活所述酶就使水解最優化，其取決于所選用于所述方法的酶或酶系統。通常，用于水解的溫度將在30-75℃，優選40-70℃的范圍。如果用較低的溫度(例如低于約35℃)，水解就進行得很慢。為避免所述分解酶的失活，所述溫度應優選不超過約70℃。為將RNA分解為5′-核苷酸，在用核酸酶，Enzyme?RP-1時，在約65℃獲得最適產出。水解的pH條件將類似取決于所選用于所述方法的酶或酶系統。用于水解的合適pH范圍可在4.0-7.0，優選5.0-6.0的范圍。在用酶RP-1來水解RNA時，優選的pH在5.5±0.25。為在水解中將所述生物量的pH維持在所需范圍內，所需加入的任何酸的性質、量和時間可很容易由那些本領域技術人員來確定。調節pH的合適的酸包括硫酸，鹽酸等。所述水解產物可以連續或分批(batchwise)方法來生產。優選以連續方式生產。用任何已知酶或酶系統處理的反應時間通常在30分鐘到24小時的范圍。優選反應時間為約1.5-2小時。更長的反應時間一般使所述產物的水解程度增加，并已經發現降低最終水解產物味道中的任何苦味。在任何已知條件產生水解產物所需要的任何已知酶的量由那些本領域技術人員來確定。一般，可預計該量為0.001-0.5％，例如0.03-0.25％(基于所述生物量的重-->量)。所述水解步驟一般在攪拌釜反應器或活塞流反應器中進行。本文所述水解方法可預計產出的產物，其包含70-95重量％，例如約7本文檔來自技高網...

【技術保護點】
生產飼料或飼料組分的方法，所述方法包含用酶法水解作用處理包含甲烷營養型細菌的微生物培養物。

【技術特征摘要】
GB 2002-2-12 0203306.61.生產飼料或飼料組分的方法，所述方法包含用酶法水解作用處理包含甲烷營養型細菌的微生物培養物。2.生產飼料或飼料組分的方法，所述方法包含下述步驟：(a)制備微生物培養物的水漿液，其包含甲烷營養型細菌可選與一或多種異養型細菌的組合；(b)可選加熱所述漿液；并且(c)用酶法水解作用處理所得產物。3.權利要求1或權利要求2的方法，其還包含分離所述水解產物的步驟。4.權利要求1到3任一的方法，其中所述培養物已經用甲烷作為碳源來生產。5.權利要求1到4任一的方法，其中所述培養物在所述酶法水解作用之前用細胞裂解來處理。6.權利要求5的方法，其中通過壓力降低法來進行細胞裂解。7.權利要求1到6任一的方法，其中所述酶法水解作用通過將所述培養物與核酸切割酶接觸來進行。8.權利要求1到7任一的方法，其中所述酶法水解作用通過將所...

【專利技術屬性】
技術研發人員：艾納莫恩，亨里克埃里克森，簡拉森，
申請(專利權)人：諾弗姆公司，
類型：發明
國別省市：NO[挪威]