本發(fā)明專利技術(shù)涉及茶多酚提取技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，包括：第一步、將茶多酚用乙酰化試劑在羥基經(jīng)催化劑催化下進(jìn)行乙酰化反應(yīng)，制得全乙酰化茶多酚；第二步、將第一步中制得的全乙酰化茶多酚經(jīng)硅膠柱層析，洗脫劑洗脫分離，得到全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯；第三步、將第二步中制得的全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯在酸性溶劑中經(jīng)活潑金屬還原水解得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯。采用本發(fā)明專利技術(shù)所生產(chǎn)表沒食子兒茶素沒食子酸酯具有色澤好、收率高、操作步驟簡單、無污染的優(yōu)點(diǎn)，且易于在大規(guī)模的生產(chǎn)上應(yīng)用。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及茶多酚提取
，更具體的說，特別涉及一種從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法。
技術(shù)介紹
茶多酚又名茶單寧、茶鞣質(zhì)，是從茶葉中提取的多酚類物質(zhì)，包括兒茶素、花青素、黃烷醇類、羥基黃烷醇類、花色甙及其甙元、黃酮醇類和酚酸類等，還含有兒茶氧化物和縮聚產(chǎn)物及咖啡等生物堿類物質(zhì)。表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）在茶多酚中含量最高、活性最強(qiáng)，因?yàn)榫哂刑厥獾亩嗔u基化學(xué)結(jié)構(gòu)而有非常強(qiáng)的抗氧化活性，能夠保護(hù)細(xì)胞和DNA免受損害，在抗癌和心血管疾病方面擔(dān)當(dāng)了重要的角色。研究表明，EGCG具有顯著的抗氧化，清除體內(nèi)自由基、抗腫瘤、抗突變、抗衰老、抗炎、抗病毒等一系列的生物活性，對預(yù)防和治療惡性腫瘤、高血脂癥、動脈硬化、腦血栓、糖尿病、肥胖病等均有良好作用，這些作用使EGCG具有非常廣闊的應(yīng)用前景和市場價(jià)值。但是由于兒茶素主要組分結(jié)構(gòu)和物理化學(xué)性質(zhì)比較相似，而且EGCG結(jié)構(gòu)中的酚羥基的存在讓其在制備過程中很容易被氧化，要想有效的從茶多酚中分離得到EGCG單體具有一定的技術(shù)難度。Chan?Tak?Hang（W02007041891）專利技術(shù)了通過乙酰化從茶葉中提取單體兒茶素的方法，萬升標(biāo)等也開發(fā)了用乙酰化轉(zhuǎn)化分離法從茶多酚中了制備了單體表沒食子兒茶素沒食子酸酯（中國專利公開號為CN101182319A），其中，EGCG全乙酸酯的脫乙酰基保護(hù)反應(yīng)是在高濃度的酸溶液中進(jìn)行的酸水解反應(yīng)，反應(yīng)完成后高濃度的酸讓反應(yīng)產(chǎn)物的后處理及溶劑的回收變得非常困難，而且因?yàn)槿狈ΡＷo(hù)，反應(yīng)產(chǎn)生的酚羥基容易被空氣中的氧氧化而使產(chǎn)品顏色變深。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，采用該方法生產(chǎn)的表沒食子兒茶素沒食子酸酯具有色澤好、收率高、操作步驟簡單、無污染等優(yōu)點(diǎn)。為了解決以上提出的問題，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案為：一種從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，包括以下步驟：第一步、將茶多酚用乙酰化試劑在羥基經(jīng)催化劑催化下進(jìn)行乙酰化反應(yīng)，制得全乙酰化茶多酚；第二步、將第一步中制得的全乙酰化茶多酚經(jīng)硅膠柱層析，洗脫劑洗脫分離，得到全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯；第三步、將第二步中制得的全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯在酸性溶劑中經(jīng)活潑金屬還原水解得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯。根據(jù)本專利技術(shù)的一優(yōu)選實(shí)施例：所述第三步中所采用的活波金屬為鋅或鎂。根據(jù)本專利技術(shù)的一優(yōu)選實(shí)施例：所述第一步中采用的乙酰化試劑為乙酸酐或乙酰氯，以及所采用的催化劑為4-二甲氨基吡啶。根據(jù)本專利技術(shù)的一優(yōu)選實(shí)施例：所述第二步中的硅膠柱層析的硅膠為200-300目。根據(jù)本專利技術(shù)的一優(yōu)選實(shí)施例：所述第二步中采用的洗脫劑為乙酸乙酯和6＃溶劑抽提油混合物，且所述混合容積中乙酸乙酯和6＃溶劑抽提油的體積比為體積比為1：0.5-2。根據(jù)本專利技術(shù)的一優(yōu)選實(shí)施例：所述第二步中采用的洗脫劑為乙酸乙酯和二氯甲烷混合物，且所述乙酸乙酯和二氯甲烷的體積比為1：3-9。根據(jù)本專利技術(shù)的一優(yōu)選實(shí)施例：所述第三步中所采用的酸性溶劑為經(jīng)非氧化性酸調(diào)節(jié)的溶劑。根據(jù)本專利技術(shù)的一優(yōu)選實(shí)施例：所述非氧化性酸為鹽酸、氫溴酸或乙酸。根據(jù)本專利技術(shù)的一優(yōu)選實(shí)施例：所述的溶劑為甲醇、乙醇、乙酸乙酯或二氯甲烷和水的混合溶劑。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果在于：1、本專利技術(shù)利用了活波金屬的還原特性，在調(diào)節(jié)為弱酸性的常規(guī)溶劑中還原水解乙酸酚酯而得到酚羥基，而且因?yàn)榛畈ń饘龠€原作用的保護(hù)，可使水解產(chǎn)生的酚羥基不易被空氣中的氧所氧化變色，確保產(chǎn)物的收率；2、并且反應(yīng)條件溫和，在反應(yīng)完畢后反應(yīng)液經(jīng)簡單的過濾、濃縮和結(jié)晶即可得到白色表沒食子兒茶素沒食子酸酯，且具有色澤好、收率高、操作步驟簡單、無污染的優(yōu)點(diǎn)，易于在大規(guī)模的生產(chǎn)上應(yīng)用。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對本專利技術(shù)作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本專利技術(shù)的實(shí)施方式不限于此。實(shí)施例一：稱取市售茶多酚（多酚含量98%，EGCG50%）50g，4-二甲氨基吡啶（DMAP）2g，置燒瓶中，加入500ml乙酸乙酯溶解并攪拌，緩慢滴加乙酸酐20ml，攪拌反應(yīng)6小時(shí)，取樣并用TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后，在攪拌條件下加入0.2mol/L稀鹽酸200ml洗滌，共洗3次，然后再以200ml純化水洗滌，分出有機(jī)相后在60℃下減壓濃縮，得稠狀物。將稠狀物以二氯甲烷溶解后經(jīng)硅膠柱層析，采用的洗脫劑為二氯甲烷/乙酸乙酯（體積比V/V＝4/1），分離得到白色全乙酰化的表沒食子兒茶素沒食子酸酯固體。將全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯固體以500ml、95%的乙醇溶解，加入乙酸20ml，攪拌，水浴加熱到35℃，加入鎂粒25g,攪拌反應(yīng)8小時(shí)，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后，過濾，減壓濃縮蒸去溶劑，濃縮物經(jīng)適量純化水溶解后至10℃下冷卻析晶2小時(shí)，過濾，真空干燥得表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）白色粉末21.5g，收率為86%。實(shí)施例二：本實(shí)施例其他與實(shí)施例一相同，不同之處在于：采用的硅膠層析洗脫劑為乙酸乙酯/6＃溶劑抽提油（體積比V/V＝1/1.5），真空干燥后得表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）白色粉末19.3g，收率為77.2%。實(shí)施例三：本實(shí)施例其他與實(shí)施例一相同，不同之處在于：全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯固體以200ml二氯甲烷溶解，加入0.2mol/L稀鹽酸300ml，攪拌，水浴加熱到35℃，加入鎂粒25g,攪拌反應(yīng)8小時(shí)，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后，過濾，減壓濃縮蒸去溶劑，濃縮物經(jīng)適量純化水溶解后至10℃下冷卻析晶2小時(shí)，過濾，真空干燥得表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）白色粉末22.1g，收率為88.4%。實(shí)施例四：本實(shí)施例其他與實(shí)施例一相同，不同之處在于：將鎂粒改為鋅粉，真空干燥得表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）白色粉末20.3g，收率為81.2%。上述實(shí)施例為本專利技術(shù)較佳的實(shí)施方式，但本專利技術(shù)的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本專利技術(shù)的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本專利技術(shù)的保護(hù)范圍之內(nèi)。本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：第一步、將茶多酚用乙酰化試劑在羥基經(jīng)催化劑催化下進(jìn)行乙酰化反應(yīng)，制得全乙酰化茶多酚；第二步、將第一步中制得的全乙酰化茶多酚經(jīng)硅膠柱層析，洗脫劑洗脫分離，得到全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯；第三步、將第二步中制得的全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯在酸性溶劑中經(jīng)活潑金屬還原水解得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特征在
于，該方法包括以下步驟：
第一步、將茶多酚用乙酰化試劑在羥基經(jīng)催化劑催化下進(jìn)行乙酰化反
應(yīng)，制得全乙酰化茶多酚；
第二步、將第一步中制得的全乙酰化茶多酚經(jīng)硅膠柱層析，洗脫劑洗
脫分離，得到全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯；
第三步、將第二步中制得的全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯在酸
性溶劑中經(jīng)活潑金屬還原水解得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子酸酯
的方法，其特征在于：所述第三步中所采用的活波金屬為鋅或鎂。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子
酸酯的方法，其特征在于：所述第一步中采用的乙酰化試劑為乙酸酐或乙
酰氯，以及所采用的催化劑為4-二甲氨基吡啶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從茶多酚中分離表沒食子兒茶素沒食子
酸酯的方法，其特征在于：所述第二步中的硅膠柱層析的硅膠為200-300
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李健，王家祥，易建平，黃忠春，
申請(專利權(quán))人：廣西濟(jì)康生物科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：廣西;45
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。