一種紅花逍遙片的質(zhì)量檢測方法技術(shù)

一種紅花逍遙片的質(zhì)量檢測方法，屬于藥物質(zhì)量控制技術(shù)領(lǐng)域。包括如下步驟：對照品溶液的制備、供試品溶液的制備、色譜條件、以芍藥苷為參照峰的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定、指紋圖譜的質(zhì)量控制。本發(fā)明專利技術(shù)采用高效液相建立標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，通過指紋圖譜得到量化參數(shù)，更有效的控制制劑的質(zhì)量，精密度較高、穩(wěn)定性、重復(fù)性均良好。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)屬于藥物質(zhì)量控制
，特別涉及一種紅花逍遙片的指紋圖譜檢測方法。
技術(shù)介紹
紅花逍遙片由當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、茯苓、紅花、皂角刺、竹葉柴胡、薄荷、甘草九味藥組成，功能主治為舒肝、理氣、活血，用于肝氣不舒，胸脅脹痛，頭暈?zāi)垦＃秤麥p退，月經(jīng)不調(diào)，乳房脹痛或伴見顏面黃褐斑。由于中藥具有成分復(fù)雜多變、活性成分多、藥效成分和毒性成分不甚明確等特點， 紅花逍遙片做為中成藥，其藥效不是來自任何單一的活性成分，其藥效作用基本上是多種活性成分共同協(xié)作的結(jié)果。然而，目前對紅花逍遙片的研究僅針對處方中當(dāng)歸、白芍、甘草、 竹葉柴胡、薄荷的薄層鑒別方法和白芍的高效液相色譜含量測定。顯然，對于紅花逍遙片這樣一個由9味中藥組成的復(fù)方制劑，其質(zhì)量控制檢測方法過于簡單，不能較準(zhǔn)確全面所映產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，也無法用于生產(chǎn)過程中、以及產(chǎn)品質(zhì)量的有效控制。中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段， 得到的能夠標(biāo)示其化學(xué)特征的色譜圖。采用中藥指紋圖譜方式，一方面可以通過指紋圖譜的特征性，有效的鑒別樣品的真?zhèn)魏彤a(chǎn)地；另一方面通過對主要指紋圖譜特征峰的面積或比例的控制，能有效控制產(chǎn)品的質(zhì)量，確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定一致，從而保證產(chǎn)品安全有效。 因此建立紅花逍遙片的指紋圖譜勢在必行，建立一種能全面檢測紅花逍遙片中有效成分的質(zhì)量檢測方法具有重要意義。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是針對上面所述紅花逍遙片的質(zhì)量控制現(xiàn)狀，提供，該方法提供一種基于高效液相色譜法的紅花肖遙片的指紋圖譜檢測方法，可行到紅花逍遙片的HPLC (高效液相色譜)指紋圖譜，可有效控制紅花逍遙片的質(zhì)量及保證其臨床療效。本專利技術(shù)的目的是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的。，其特征在于，包括如下步驟(1)對照品溶液的制備取芍藥苷對照品，置于容量瓶中，加甲醇溶解，搖勻，制成對照品溶液；(2)供試品溶液的制備取紅花逍遙片制劑粉末，置錐形瓶中，加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，經(jīng)微孔濾膜濾過，濾液作為供試品溶液；(3)色譜條件色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，規(guī)格為4. 6_Χ250_，5μπι;流動相Α為乙腈，B為O. 1%磷酸水溶液；采用梯度洗脫，洗脫程序如下O分鐘時,9%流動相A、91%流動相B ；5分鐘時，12%流動相A、88%流動相B ；25分鐘時，12%流動相A、88%流動相B ；30分鐘時，15%流動相A、85%流動相B ；65分鐘時，45%流動相A、55%流動相B ；85分鐘時，45%流動相A、55%流動相B ；流速1. OmL/min ;檢測波長230nm ;柱溫25°C ；(4)以芍藥苷為參照峰的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定吸取上述對照品溶液和供試品溶液各8批，每批10 μ L，分別注入高效液相色譜儀中， 按高效液相色譜法測定，記錄色譜圖，依據(jù)所得的8批對照品的指紋圖譜，制定標(biāo)準(zhǔn)指紋圖所述紅花逍遙片的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，各共有峰以芍藥苷為參照峰，計算相對保留時間和相對峰面積；(5)指紋圖譜的質(zhì)量控制將紅花逍遙片的供試品溶液指紋圖譜與制定的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進行比較，計算相似度， 識別兩者所具有的共同吸收峰的數(shù)量，確定相似度。所述步驟(2)中超聲處理時間為25 35min。所述步驟(2)中微孔濾膜的孔徑為O. 45 μ m。所述步驟(4)中相對保留時間的計算公式為相對保留時間=其它各組分峰的保留時間/參照峰的保留時間。 相對峰面積的計算公式為相對峰面積=其它各組分峰的峰面積/參照峰的峰面積。所述參照峰為芍藥苷峰。步驟(4)中所述相對保留時間和相對峰面積分別為相對保留時間1 (O. 192 O. 193),2 (O. 579 O. 591),3 (O. 795),4 (I. 000),5 (I. 317 I. 324)，6 (I. 590 I. 602)，7 (I. 701 I. 711)，8 (I. 777 I. 793)，9 (I. 807 I.822)，10(1. 992 2. 014)；相對峰面積1 (O. 6296 O. 7345)，2 (O. 8666 I. 1740)，3 (O. 7374 O. 8077)，4 (I. 000),5 (O. 2065 O. 2473),6 (O. 0378 O. 0440), 7 (O. 0485 O. 0514),8 (O. 0532 O.0600,9(0. 0314 O. 0501)，10(0. 0614 O. 0706)；步驟(5)中所述確定相似度是指將紅花逍遙片的供試品溶液指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)圖譜比對，其相似度應(yīng)為O. 90 I. 00。本專利技術(shù)所述指紋圖譜的質(zhì)量控制，運用國家藥典委員會制定的《中藥指紋圖譜相似度計算軟件》(2004)，經(jīng)過多點校正，色譜峰的匹配，計算供試品溶液指紋圖譜與制定的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的相似度；指紋圖譜相似度計算參數(shù)設(shè)置為時間寬度為O. 2秒；校正方式采用多點校正，校正色譜峰的匹配點為共有峰，峰1(0. 192 O. 193)，峰2 (O. 579 O. 591)， 峰 3 (O. 795)，峰 4 (I. 000)，峰 10 (I. 992 2. 014)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果是a.本專利技術(shù)采用高效液相建立標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，通過指紋圖譜得到量化參數(shù)，更有效的控制制劑的質(zhì)量。b.本專利技術(shù)采用高效液相色譜指紋圖譜，以芍藥藥材中的有效成分(芍藥苷)特征為主的指紋圖譜來全面控制紅花逍遙片的質(zhì)量，更加完善了制劑的質(zhì)量控制。c.通過實驗證明，本專利技術(shù)質(zhì)量控制方法對紅花逍遙片的質(zhì)量控制更為有效，方法精密度較高、穩(wěn)定性、重復(fù)性均良好。能有效控制產(chǎn)品的質(zhì)量，確保產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，藥性和療效基本一致，從而保證產(chǎn)品的安全有效。附圖說明圖I為本專利技術(shù)所述以芍藥苷為參照制得的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。圖2為本專利技術(shù)所述紅花逍遙片制得的8批樣品指紋圖譜。具體實施方式實施例I :紅花逍遙片標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜建立。(I)儀器及試劑高效液相色譜儀島津LC - IOATvp高效液相色譜儀(SH) — MlOAvp檢測器，CLASS-VP軟件)；數(shù)控超聲波清洗器KQ_250DB型，昆山市超聲儀器有限公司；十萬分之一天平島津AUW220 ;萬分之一天平AB104 — N型，梅特勒一托利多； Millipore超純水儀。乙腈山東禹王實驗有限公司化工分公司；甲醇上海振興化工一廠；磷酸(優(yōu)級純)天津精細化學(xué)品開發(fā)有限公司；超純水。芍藥苷對照品中國藥品生物制品檢定所；紅花逍遙片江西普正制藥有限公司。( 2 )對照品溶液的制備。取芍藥苷約23mg，精密稱定，置25mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，精密吸取 2mL，置25mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻即得。( 3 )供試品溶液的制備。取本品20片，除去薄膜衣，研細，取約O. 35g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理25min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，經(jīng)微孔濾膜(O. 45 μ m)濾過，即得。(4)色譜條件。色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6 mmX 250 mm，5 μ m);流動相A 為乙腈，B為O. 1%磷酸水溶液，梯度洗脫(見表I);進樣量10μ L ;檢測本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種紅花逍遙片的質(zhì)量檢測方法,其特征在于，包括如下步驟：（1）對照品溶液的制備取芍藥苷對照品，置于容量瓶中，加甲醇溶解，搖勻，制成對照品溶液；?（2）供試品溶液的制備取紅花逍遙片制劑粉末，置錐形瓶中，加甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，經(jīng)微孔濾膜濾過，濾液作為供試品溶液；（3）色譜條件色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，規(guī)格為：4.6mm×250mm，5μm；流動相：A為乙腈，B為0.1%磷酸水溶液；采用梯度洗脫，洗脫程序如下：0分鐘時，9%流動相A、91%流動相B；5分鐘時，12%流動相A、88%流動相B；25分鐘時，12%流動相A、88%流動相B；30分鐘時，15%流動相A、85%流動相B；65分鐘時，45%流動相A、55%流動相B；85分鐘時，45%流動相A、55%流動相B；流速：1.0mL/min；檢測波長：230nm；柱溫：25℃；（4）以芍藥苷為參照峰的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定吸取上述對照品溶液和供試品溶液各8批，每批10μL，分別注入高效液相色譜儀中，按高效液相色譜法測定，記錄色譜圖，依據(jù)所得的8批對照品的指紋圖譜，制定標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；所述紅花逍遙片的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，各共有峰以芍藥苷為參照峰，計算相對保留時間和相對峰面積；（5）指紋圖譜的質(zhì)量控制將紅花逍遙片的供試品溶液指紋圖譜與制定的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進行比較，計算相似度，識別兩者所具有的共同吸收峰的數(shù)量，確定相似度。...

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：肖軍平，饒毅，吳永忠，余寶平，鄒貴陽，
申請(專利權(quán))人：江西普正制藥有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：