朝鮮槐總黃酮提取物及其制備方法和應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)涉及一種朝鮮槐總黃酮提取物及其制備方法和應(yīng)用，它可以通過(guò)這樣的方法制得，該方法包括以下步驟：用提取溶媒提取朝鮮槐的心材、根皮、莖皮、枝皮、葉、葉梗、花、果實(shí)和種子；過(guò)濾該提取液并濃縮；濃縮液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂，以不同濃度的甲醇或乙醇水溶液洗脫；收集洗脫液并濃縮至干，獲得朝鮮槐總黃酮提取物。按此方法獲得的朝鮮槐總黃酮提取物的總異黃酮含量為15%～90%，且含1～15%的鳶尾苷和6～57%的SaikoisoflavonosideA。該朝鮮槐總黃酮提取物具有雌激素樣作用，可用于制備雌激素類(lèi)藥物或保健食品，用來(lái)預(yù)防或治療乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、骨質(zhì)疏松、更年期綜合癥。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專(zhuān)利技術(shù)屬于醫(yī)藥
涉及朝鮮槐總黃酮的制備方法及其應(yīng)用，具體涉及朝鮮槐總黃酮的制備方法和在制備雌激素類(lèi)藥物或保健食品中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
朝鮮槐amurensis Rupr. et Maxim.)又名山槐、高麗槐、懷槐,為豆科馬鞍樹(shù)屬植物。朝鮮槐全株含多種黃酮類(lèi)成分化合物芒柄花黃素(formoononetin)、染料木素(genistein)、阿夫羅摩辛(afromosin)、大豆黃素(afromosin)、鳶尾苷元、葛花亭等及其苷類(lèi)，是少數(shù)幾種含4種異黃酮(植物雌激素)的植物之一。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，女性乳腺癌發(fā)生率與其膳食中植物雌激素成分的含量相關(guān)。 亞洲地區(qū)居民習(xí)慣食用含異黃酮較多的豆腐等大豆食品(富含異黃酮類(lèi)成分)，這些地區(qū)的乳腺癌發(fā)生率較低。而當(dāng)植物雌激素高攝入地區(qū)的日本居民移居到低攝入地區(qū)的美國(guó)后，隨著他們?cè)跂|道國(guó)居住時(shí)間延長(zhǎng)，其乳腺癌發(fā)生率也逐漸增加，可見(jiàn)異黃酮類(lèi)植物雌激素對(duì)改善女性健康狀況，提高生活質(zhì)量具有非常重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，異黃酮具有弱雌激素活性，可與雌激素受體結(jié)合，發(fā)揮雌激素樣或抗雌激素活性，表現(xiàn)出對(duì)人體雌激素水平的雙向調(diào)節(jié)作用。盡管異黃酮類(lèi)植物雌激素比內(nèi)源性或合成性激素作用小，但在適量濃度下可僅與常見(jiàn)于前列腺、骨和血管組織的β -雌激素受體結(jié)合，產(chǎn)生有益作用，而不與主要分布于乳腺、子宮和卵巢中的α -雌激素受體結(jié)合，因此對(duì)乳腺和卵巢幾無(wú)不良影響。現(xiàn)代研究證實(shí)，朝鮮槐中提取得到的異黃酮類(lèi)化合物具有弱雌激素樣作用，對(duì)于預(yù)防和治療乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、改善骨質(zhì)疏松和改善婦女更年期癥狀等均有一定的作用。雖有報(bào)道，主要起生理活性的是植物中的異黃酮苷元，而異黃酮苷則需要在腸道菌群的作用下，脫掉糖苷而成為具有異黃酮苷元后，再經(jīng)過(guò)不同的活化代謝途徑，來(lái)發(fā)揮雌激素或抗雌激素樣作用。但朝鮮槐主要含有異黃酮苷類(lèi)(約占藥材重量的7%)，而異黃酮苷元不足1%，因此專(zhuān)利技術(shù)人比較了朝鮮槐總黃酮提取物及其水解后所得苷元提取物的雌激素樣作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二者的雌激素樣作用無(wú)顯著性差異(圖I)。鑒于目前還未見(jiàn)有市售的朝鮮槐總黃酮提取物，因此開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單可行的方法獲得朝鮮槐總黃酮提取物，用于制備雌激素性藥物或保健食品，可以填補(bǔ)本領(lǐng)域關(guān)于朝鮮槐總黃酮提取及應(yīng)用方面的空白。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)的目的是提供一種朝鮮槐總黃酮提取物，其中包含以提取物干品的重量計(jì)15 90%的總異黃酮，并且在總黃酮提取物中含有以提取物干品的重量計(jì)I 15%的鳶尾苷和6 57%的Saikoisoflavonoside Α，其結(jié)構(gòu)式為本專(zhuān)利技術(shù)所述的朝鮮槐總黃酮提取物，含有對(duì)藥理活性起作用的主要化合物，具體是染料木苷、鳶尾苷、Saikoisoflavonoside A、懷槐異黃酮苷、 芒柄花黃素、染料木素、阿夫羅摩辛、大豆黃素等，它可以通過(guò)如下方法制得，該方法包括下列步驟 (1)用提取溶媒提取上述原料中的至少一種，收集提取液； (2)濾過(guò)該提取液并濃縮至無(wú)醇味； (3)濃縮液以蒸餾水溶解，濾過(guò)，濾液連續(xù)通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂層析柱進(jìn)行吸附分離，使目標(biāo)成分吸附于樹(shù)脂中； (4)用水淋洗，再用不同體積濃度的甲醇或乙醇水溶液洗脫，收集合并洗脫液，濃縮至干，獲得朝鮮槐總黃酮提取物。實(shí)現(xiàn)本專(zhuān)利技術(shù)的方法是用甲醇或乙醇進(jìn)行第一次提取(步驟(1))，所用甲醇或乙醇濃度在5%到95%范圍內(nèi)，優(yōu)選濃度為5(Γ70%，藥材與溶劑的質(zhì)量體積比在I :1到I :50的范圍內(nèi)，優(yōu)選為I :10到I :20的范圍內(nèi)，溫度在室溫到溶劑的回流范圍內(nèi)，優(yōu)選在5(Γ100° C，提取方式為閃式提取、超聲振蕩提取、回流提取、浸潰提取、微波提取，優(yōu)選回流提取。用于步驟(I)的藥材為朝鮮槐的心材、根皮、莖皮、枝皮、枝、葉、花、果實(shí)和種子中的至少一種，優(yōu)選為莖皮。用于步驟(3)的大孔吸附樹(shù)脂為非極性苯乙烯型共聚體，優(yōu)選DlOl或AB — 8。用于步驟(4)的淋洗水體積用量為所述大孔吸附樹(shù)脂柱床體積的4 25倍，洗脫劑體積用量為所述大孔吸附樹(shù)脂柱床體積的4 25倍，所用洗脫劑為體積濃度為10 95%的甲醇或乙醇水溶液。優(yōu)選洗脫程序?yàn)? 5倍柱床體積水淋洗，然后用體積濃度10 20%乙醇以4 10倍柱床體積洗脫除雜，再用體積濃度50 70%乙醇以5 10倍柱床體積洗脫。收集體積濃度50 70%乙醇洗脫液，濃縮至干，即得朝鮮槐總黃酮提取物。影響本提取工藝的因素有原料的質(zhì)量及加工過(guò)程中的實(shí)際操作情況，原料的質(zhì)量差異取決于收集該植物材料的時(shí)間及處理干燥的方式。按上述方法所得的朝鮮槐總黃酮提取物中含總異黃酮的含量在15、0%，該提取物以總異黃酮計(jì)在I 25mg/kg劑量下于藥理活性初步實(shí)驗(yàn)中均顯示出高活性，并且不需要進(jìn)一步的特殊處理，且隨時(shí)間的推移活性保持穩(wěn)定。本專(zhuān)利技術(shù)所述朝鮮槐總黃酮提取物可用于制備補(bǔ)充雌激素的藥物或保健食品，用于預(yù)防或治療乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、骨質(zhì)疏松、更年期綜合癥。附圖說(shuō)明本專(zhuān)利技術(shù)所述實(shí)施例5中藥理活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果可由下述圖例描述 圖I.朝鮮槐總黃酮提取物對(duì)3周齡雌性幼鼠子宮的作用。(平均值+50，11=10，*= 〈0.01vs.陰性對(duì)照組)具體實(shí)施例方式實(shí)施例I 稱取干燥朝鮮槐莖皮粉末(過(guò)24目篩)約I. 0kg，加入30L 60%乙醇浸泡30分鐘后，回流提取3次，每次I小時(shí)。合并提取液，濾過(guò)，減壓濃縮。濃縮液以水溶解，濾過(guò)，過(guò)D — 101大孔吸附樹(shù)脂，5倍柱床體積水淋洗，4倍柱床體積10%乙醇洗脫除雜，6倍柱床體積60%乙醇洗脫，合并60%乙醇洗脫液,濃縮至干，即得。以其中的主要成分Saikoisoflavonoside A為對(duì)照品，用紫外分光光度法進(jìn)行定量，計(jì)算提取所得浸膏中總黃酮的含量為53%，HPLC法檢測(cè)提取物中鳶尾苷和Saikoisoflavonoside A的含量分別為提取物的4. 5%和24. 2%。實(shí)施例2 稱取干燥朝鮮槐莖皮粉末(過(guò)50目篩)約I. Okg,加入15L 50%乙醇浸泡30分鐘后，回流提取4次，每次I. 5小時(shí)。合并提取液，過(guò)濾，減壓濃縮。濃縮液以水溶解，濾過(guò)，過(guò)ADS - 7大孔吸附樹(shù)脂，10倍柱床體積水淋洗，8倍柱床體積50%乙醇洗脫，合并50%乙醇洗 脫液，濃縮至干，即得。以其中的主要成分Saikoisoflavonoside A為對(duì)照品，用紫外分光光度法進(jìn)行定量，計(jì)算提取所得浸膏中總黃酮的含量為38%，HPLC法檢測(cè)提取物中鳶尾苷和Saikoisoflavonoside A的含量分別為提取物的3. 4%和16. 7%。實(shí)施例3 稱取干燥朝鮮槐莖皮粉末(過(guò)65目篩)約I. 0kg，加入20L 70%乙醇浸泡30分鐘后，回流提取3次，每次I. 5小時(shí)。合并提取液，過(guò)濾，減壓濃縮。濃縮液以水溶解，濾過(guò)，加入到AB-8大孔樹(shù)脂柱中進(jìn)行飽和吸附，5倍柱床體積水淋洗，然后用4倍柱床體20%乙醇洗脫除去雜質(zhì)，再用5倍柱床體的70%乙醇洗脫，合并70%乙醇洗脫液，濃縮至干，即得。以其中的主要成分Saikoisoflavonoside A為對(duì)照品,用紫外分光光度法進(jìn)行定量,計(jì)算所得浸膏中總黃酮的含量為82%，HPLC法檢測(cè)提取物中鳶尾苷和Saikoisoflavonoside A的含量分別為提取物的9. 4%和54. 5%。實(shí)施例4 本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
朝鮮槐總黃酮提取物，其特征在于提取物以朝鮮槐的心材、根皮、莖皮、枝皮、枝、葉、花、果實(shí)和種子中的至少一種為原料獲得的富含異黃酮苷的提取物；該提取物是由包括以下步驟的方法得到的：？（1）？？用提取溶媒提取上述原料中的至少一種，收集提取液；（2）？？濾過(guò)該提取液并濃縮至無(wú)醇味；（3）？？濃縮液以蒸餾水溶解，濾過(guò)，濾液連續(xù)通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂層析柱進(jìn)行吸附分離，使目標(biāo)成分吸附于樹(shù)脂中；（4）用水淋洗，再用不同體積濃度的甲醇或乙醇水溶液洗脫，收集合并洗脫液，濃縮至干，獲得朝鮮槐總黃酮提取物。

【技術(shù)特征摘要】
1.朝鮮槐總黃酮提取物，其特征在于提取物以朝鮮槐的心材、根皮、莖皮、枝皮、枝、葉、花、果實(shí)和種子中的至少一種為原料獲得的富含異黃酮苷的提取物；該提取物是由包括以下步驟的方法得到的 (1)用提取溶媒提取上述原料中的至少一種，收集提取液； (2)濾過(guò)該提取液并濃縮至無(wú)醇味； (3)濃縮液以蒸餾水溶解，濾過(guò)，濾液連續(xù)通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂層析柱進(jìn)行吸附分離，使目標(biāo)成分吸附于樹(shù)脂中； (4)用水淋洗，再用不同體積濃度的甲醇或乙醇水溶液洗脫，收集合并洗脫液，濃縮至干，獲得朝鮮槐總黃酮提取物。2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于步驟(I)所述提取溶媒為甲醇或乙醇或它們的體積濃度為5 95%的水溶液，藥材與甲醇或乙醇或它們的水溶液的質(zhì)量體積比為I :I I :50，溫度在室溫到溶劑的回流溫度范圍內(nèi)。3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于步驟(I)所述提取方式為閃式提取、超聲振蕩提取、回流提取、浸潰提取或微波提取。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于甲醇或乙醇的濃度為50 70%;藥材與甲醇或乙醇或它們的水溶液的質(zhì)量體積比為I :10 I :20 ;溫度為5(Γ100° C。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的...

【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王東，尹濤，呂重寧，劉東春，夏明鈺，崔征，代英輝，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：沈陽(yáng)藥科大學(xué)，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：